(一)病史
首先區分原發閉經與繼發閉經。對原發閉經者，應了解其家族史，生長發育史及有無因某種嚴重疾病影響其發育等。對繼發閉經者應了解過去月經情況、閉經期限、閉經前有無誘因、診治情況，曾否用過內分泌治療及對各種治療的反應、健康狀況及生育、生活和工作情況等。
(二)體檢
1.全身情況 注意發育、營養、胖瘦、精神狀態、智力與第二性征發育以及毛發多少與分布、乳房有無乳汁分泌等。必要時查視野、蝶鞍斷層攝片、CT檢查、染色體核型分析、腹腔鏡檢及有關內分泌檢查等。
2.婦科檢查 注意外陰發育情況，有無畸形及內生殖器有無異常等。疑有宮頸、宮腔粘連者，可用子宮探針探測是否通暢，或做碘油造影。必要時作陰道、宮頸粘液涂片及/或內膜活檢等，以初步了解性激素水平。
(三)內分泌檢查
除外器質性病變后，可按以下步驟作有關內分泌方面的檢查。
1.孕激素試驗 此系檢測內源性雌激素水平，以評價體內雌激素水平及生殖道的完整性。單獨用孕激素作試驗，方法：黃體酮20mg，每日肌注一次，連續5天;或口服甲孕酮10mg，每日一次，連服5天，觀察有無撤藥性出血。用藥后2～7天出現撤藥性陰道出血者為陽性反應，表示生殖道發育正常，子宮內膜的功能存在，已受雌激素充分作用，因而對黃體酮能產生分泌期變化。同時說明“性腺軸”的功能基本上存在，但可能不夠完善而不排卵。陰性反應不能除外子宮及生殖道異常，需作雌-孕激素試驗，以進一步明確診斷。
有條件時可測定血生乳素，如正常，可初步除外垂體腫瘤。如高于正常，特別是有泌乳情況時，應行蝶鞍層攝片，排除腫瘤可能。必要及可能時，可作CT檢查，以發現垂體微小腫瘤。
2.雌-孕激素試驗 孕激素試驗陰性者，可能系內源性雌激素水平不足，內膜受雌激素刺激生長不夠所致�？擅咳湛诜严┐品�1mg，連服21天;也可用苯甲酸雌二醇，每3天肌注2mg，連用7次，最后5天肌注黃體酮每天20mg。停藥后有出血者，說明體內雌激素水平不足，病變多在卵巢部位以上，需進一步尋找病因。停藥后無出血者表明病變在子宮內膜。
3.垂體促性腺激素測定 雌激素撤藥出血試驗陽性者，示體內雌激素水平低下，應進一步區分系因卵巢本身受抑或因下丘腦-垂體功能障礙所致�？捎梅琶夥ɑ蛏锓y定促性腺激素(FSH、LN)的水平。LH低下(<5IU/L)或認為系促性腺激素合成分泌不足，病因可能在垂體或下丘腦。FSH上升(>40IU/L)則多與卵巢功能衰退有關。FSH值在5～30IU/L之間者，提示卵巢有濾泡存在。
4.垂體興奮試驗 如促性腺激素低于正常或在正常低限范圍內，應辨別病變是在垂體還是在下丘腦。可用促性腺激素釋放激素(GnRH)作垂體興奮試驗來加以區分。方法：試驗前測LH，然后靜滴LHRH100μg4小時，每15、30、60及120分鐘各抽血測LH。下丘腦功能障礙者，在滴注30～45分鐘LH上升，60～90分鐘時下降，2～4小時內可有第二次上升，并能維持約4小時。垂體功能有缺陷時，LH雖有第一次上升，但不能維持很久，即使繼續用藥，也不出現第二次上升現象，說明垂體合成LH的功能受到限制。如因下丘腦受損而垂體有惰性時，開始滴藥時可無反應，但在2小時左右可出現延遲反應。
